Qlükoza oksidaz qlükoza təyini metodu

Metodun prinsipi. Metod qlükoza oksidaz fermentinin təsirinin spesifikliyinə əsaslanır. Bu ferment qlükozanı molekulyar oksigen iştirakı ilə oksidləşdirir, öz-özünə qlükon turşusuna hidrolizə edən qlükonolakton meydana gəlir. Qlükoza oksidazı hidrogen peroksid (H) meydana gətirmək üçün qlükoza oksidləşir₂Ah₂), peroksidazın təsiri ilə 4-aminoantipirin və fenol ilə reaksiya verir. Nəticədə, 510 nm məsafədəki optik sıxlığı nümunədəki qlükoza konsentrasiyasına mütənasib olan çəhrayı rəngli bir birləşmə yaranır.

qlükoza + O₂ + H₂Ah → qlükon turşusu + H₂Ah₂

2 N₂Ah₂ + 4-aminoantipirin + fenol → quinonymine + 4H₂Ah

Avadanlıqlar CPK, sentrifuqa, termostat, dayaqlar, sınaq boruları, pipetlər, bioloji material, işçi məhlulun tərkibindəki reagentlər.

eksperimental nümunə, ml

standart nümunə, ml

boş sınaq (N₂O), ml

Qlükoza kalibrləmə məhlulu (arayış)

Borular bir termostatda 37 ° C-də 15 dəqiqə inkubasiya edilir, sonra boş bir nümunəyə qarşı N 5 qat qalınlığı olan kublardakı yaşıl filtrlə CPC-də rənglənir.₂O). İnkubasiya sonrası 1 saat ərzində çəhrayı rəng sabitdir.

Hesablama qlükoza tərkibi aşağıdakı formula ilə istehsal olunur:

C =x C standart harada

C, eksperimental nümunədəki qlükoza miqdarı, mol / l,

Eop - nümunənin optik sıxlığı,

Yeyir - kalibrləmə nümunəsinin optik sıxlığı,

C standartı - kalibrləmə məhlulundakı tərkib, mol / l.

Normal dəyərlər:  yenidoğulmuşlarda - 2.8-4.4 mmol / l

 uşaqlar - 3,9 -5,8 mmol / l

 böyüklər - 3,9 - 6,2 mmol / l

Hipoqlikemiya (GHC).Qan qlükozasının artması bir çox səbəbdən qaynaqlanır, buna görə hiperglisemiyanın iki qrupu fərqlənir.

1. İnsular - bədəndə insulinin çatışmazlığı və ya təsirinin səmərəsizliyi ilə əlaqələndirilir.

2. Həddindən artıq (ekstrasensular) - insulinin təsirindən asılı deyil.

HHC-lərin meydana gəlməsində aşağıdakı proseslər ən əhəmiyyətlidir: glikogenin parçalanmasının artması, neoglukogenezin artması, glikogen sintezinin inhibə edilməsi, hormonal insulin antaqonistlərinin təsiri altında toxuma qlükoza istifadəsinin azalması: somatotropin, qlükortikoidlər, tiroksin, tirotropin.

Alimentar hiperglisemiya qanda qlükoza həddindən artıq suqəbuledici ilə qeyd olunur (məsələn, şəkər yükü ilə hiperglisemiya). "Hepatik" hiperglisemiya diffuz qaraciyər lezyonlarında meydana gəlir.

Davamlı və ağır hiperglisemiya ən çox diabet xəstəliyi ilə müşayiət olunur. İnsulindən asılı şəkərli diabet və insulindən asılı olmayan şəkərli diabet və ya müvafiq olaraq I tip şəkərli diabet və II tip diabet mellitusunu təcrid etmək adətdir. I tip diabetin meydana gəlməsi, ilk növbədə, insulinin sintezi və metabolizması ilə əlaqələndirilir.

Hiperglisemiyanın ikinci qrupu, ilk növbədə hormon istehsal edən endokrin bezlərin hiperfunksiyası - insulin antaqonistləri ilə əlaqələndirilir. İtsenko-Cuşinq sindromu və xəstəlik, akromegaliya, tirotoksikoz, feokromositoma, qlükoganoma kimi xəstəliklərdə müşahidə olunur. Qan qlükoza səviyyəsi müəyyən qaraciyər xəstəlikləri (xüsusən qaraciyər sirozu olan xəstələrin 10-30% -də), hemokromatoz (piqmentli qaraciyər sirozu, bronz şəkərli diabet) ilə artır.

Hipoqlikemiya (GPG) - qan qlükozasının azalması - ən çox qanda insulin səviyyəsinin mütləq və ya nisbi artması ilə əlaqələndirilir. Kəskin və xroniki hepatit, siroz, kəskin və subakut qaraciyər distrofiyası, alkoqol intoksikasiyası, arsen, fosfor ilə zəhərlənmə, qaraciyərdə olan uzunmüddətli qaraciyər xəstəliyi ilə qaraciyərdə glikogenoliz və qlikoneogenez proseslərinin şiddəti arasındakı disbalans nəticəsində ekstrapankreatik hipoqemiya qeyd olunur. . Qan qlükoza konsentrasiyasının azalması tez-tez özofagusun xərçəngindən və pankreas xaricində lokalizasiyanın digər bədxassəli şişlərindən əziyyət çəkən xəstələrdə (fibroma, fibrosarkoma, neyroma), habelə əlçatmaz qusma, anoreksiya, qaraciyər diabeti, uremiya, profilli laktasiya və hamilə qadınlarda qlükozuriya ilə müşahidə olunur.

Hipoqlikemiya zehni travma, ensefalit, subaraknoid qanaxma, beyin şişi səbəbiylə mərkəzi mənşəli ola bilər.

1. Karbohidratların həzm olunmasının irsi pozğunluqları.

2. Hiperqlikozemiyanın hansı növləri sizə məlumdur?

3. Patoloji hiperglukozemiyanın səbəbləri nələrdir?

4. İnsulindən asılı diabet xəstəliyinin səbəbi nədir?

5. İrsi xəstəliklərin biokimyəvi səbəbləri hansılardır: a) glikogenoz? b) aqlikogenoz? c) fruktozemiya? d) qalaktozemiya?

6. Oruc zamanı karbohidrat mübadiləsində biokimyəvi dəyişikliklər hansılardır?

7. Qlükoza dözümlülüyünün müəyyənləşdirilməsi metodu prinsipi.

Qlükoza oksidaz üsulu nə vaxt təyin olunur?

Bu test, dəyərsizləşmiş şəkər tolerantlığını və prediabetin inkişafını, həmçinin xəstəliyin yüksəkliyində aşkar etmək üçün istifadə olunur. Ancaq bu məqsədlər üçün analiz nadir hallarda istifadə olunur, bu, yüksək qiymətə və bir nəticə gözləməkdən qaynaqlanır. Çox vaxt bu metoddan istifadə edərək qan və sidikdə qlükoza təyini aşağıdakı xəstəliklərin differensial diaqnozunda istifadə olunur:

Şəkər dərhal azalır! Zamanla diabet, görmə problemləri, dəri və saç vəziyyəti, ülserlər, qanqrena və hətta xərçəng şişləri kimi xəstəliklərin hamısına səbəb ola bilər! İnsanlar şəkər səviyyələrini normallaşdırmaq üçün acı təcrübə öyrətdilər. oxuyun

• laktoza dözümsüzlük sindromu,
• fruktoza dözümsüzlük,
• bədən mayeləri ilə fruktoza ifraz,
• sidikdə pentozanın konsentrasiyasının artması.

Qlükoza oksidaz testinin şübhəsiz üstünlüyü dəqiqliyidir.

Bu metodun əsası nədir?

Qanda qlükoza konsentrasiyasını təyin etmək üçün müxtəlif üsullar mövcuddur, lakin qlükoza oksidazı ən doğrudur. Şəkərin atmosfer oksigeni ilə qarşılıqlı təsiri zamanı reagentin oksidləşməsinə əsaslanır. Hidrogen peroksid məhlula buraxılır. Bu maddə rəngli bir birləşmə meydana gətirmək üçün ortotoluidin ilə qarşılıqlı təsir göstərir. Bu reaksiyanın davranışı üçün xüsusi fermentlərin olması zəruridir. Oksidləşmə reaksiyası zamanı qlükoza oksidaza, mayenin ləkələnməsi zamanı isə peroksidaz olmalıdır. Çözümün rəng intensivliyi qlükoza miqdarından asılı olacaq və yüksək tərkibində ən sıx olacaqdır.

Qlükoza oksidaz qlükoza təyini

Nəticənin qiymətləndirilməsi eyni müddətdən sonra fotometriyanın kəmiyyət metodundan istifadə etməklə baş verir. Müəyyən bir elan şəkər normasını ehtiva edən bir kalibrləmə həllini istifadə etmək məcburidir və bundan başlayaraq bədən mayelərindəki qlükoza konsentrasiyasını, tez-tez qan içində qiymətləndirə bilərsiniz.

Təhlil necə aparılır?

Material xəstədən boş bir mədədə alınır. Test üçün venoz qan 5 ml miqdarda istifadə olunur. Diaqnoz qoyulması ərəfəsində xəstəyə ciddi bir diyet göstərilir. Bu nəticənin etibarlılığını qiymətləndirməyə və mümkün analiz səhvlərini istisna etməyə imkan verəcəkdir. Qan qəbul etməzdən 2 gün əvvəl xəstə spirtli içki və siqaret çəkmək kimi pis vərdişlərindən imtina etməlidir. Həddindən artıq şirin qidaların qəbulunu məhdudlaşdırmaq və mümkün olduqda stresli vəziyyətlərdən çəkinmək də lazımdır.

Şəkər ilə plazma əldə etmək üçün qan sentrifuqadır.

Ən tez-tez, qlükoza konsentrasiyasını müəyyənləşdirmək üçün bu üsul forma elementləri təcrid olunmuş santrifüjizasiya ilə həyata keçirilir. Artıq plazmadakı şəkərin miqdarı müəyyənləşdirilir. Ona bütün zəruri reagentlər əlavə edildikdə, test otaq temperaturunda aparılıbsa, 20 dəqiqədən sonra rəng müşahidə olunur. Qlükoza hesablanması kalibrləmə cədvəlinə və ya porsiya qaydalarına əsasən aparılır.

Tədqiqat Reagentləri

Şəkər təyin etmək üçün qanda qlükoza təyin etmək üçün ekspress metodlardan istifadə etmək ən əlverişlidir. Bu istifadə rahatlığı və sürətli nəticələr ilə əlaqədardır. Bundan əlavə, xəstənin laboratoriyaya və ya xəstəxanaya getməsi lazım deyil. Lakin qlükoza oksidaz testindən fərqli olaraq belə bir diaqnoz etibarlı deyil. Qlükozanı digər şəkərlərdən fərqləndirmədiyi və birlikdə konsentrasiyasını təyin etdiyi üçün.

Qlükoza oksidaz reaksiyasının əsasını natrium xlorid 9% həll və sink sulfat 50% təşkil edir. Onlar qanın sentrifuqası mərhələsində əlavə olunur. Bundan əlavə, sirkə turşusu və natrium asetat olan bir tampon həll istifadə olunur. Titrləmə metodu onun pH səviyyəsini 4.8 səviyyəsində müəyyənləşdirir. Bundan sonra, qlükoza oksidazı əlavə olunur, bunun nəticəsində hidrogen peroksid və peroksidaza sərbəst buraxılır, bu da dəqiq nəticə əldə etmək üçün məhlulun istənilən konsentrasiyaya boyanmasında iştirak edir.

Təhlildəki normalar

Şəkərin ölçülməsi xüsusi bölmələrdə - bir litr həll üçün millimollarda aparılır.

Qlükoza oksidaz qan testi boş bir mədədə məcburidir və bunun üçün plazma və ya serum istifadə edin. Həm qadınlar, həm də kişilər üçün böyüklər üçün onun miqdarının norması 3.3-5.5-dir. 15 yaşdan kiçik uşaqlar üçün bu göstərici bir qədər aşağıdır və 3.2-5.3 arasında dəyişir. Yenidoğulmuşlarda qan qlükoza 1.7-4.2-dir. Göstəricilərdə artım bir xəstədə şəkərli diabetin inkişafı və ya qlükoza dözümlü olması ilə müşahidə olunur. Bu vəziyyət prediabetdir və vaxtında müalicə edilməzsə, tezliklə bu ağır patologiyanın inkişafına səbəb olacaqdır.

Hələ diabet xəstəliyini müalicə etmək mümkünsüz görünür?

İndi bu sətirləri oxuduğunuza görə, yüksək qan şəkərinə qarşı mübarizədə qələbə hələ sizin tərəfinizdə deyil.

Artıq xəstəxanada müalicə barədə düşünmüsünüz? Bu başa düşüləndir, çünki diabet müalicə olunmazsa ölümlə nəticələnə biləcək çox təhlükəli bir xəstəlikdir. Daimi susuzluq, tez siymə, bulanıq görmə. Bütün bu simptomlar sizə əvvəlcədən tanışdır.

Ancaq təsiri deyil, səbəbi müalicə etmək mümkündürmü? Mövcud diabet müalicəsi haqqında bir məqalə oxumağı məsləhət görürük. Məqaləni oxuyun >>